تولید روتاویروس گاوی بازآرایی شده از طریق تکثیر آن با نسبت بالای عفونت‏زایی ویروس به سلول در کشت سلول و تکثیر ژن‏های غیر ساختمانی با روش rt-pcr

نویسندگان

elham ahmadi

m.sc. student ,department of virology,faculty of medical sciences,tarbiat modares university,tehran,iran . hooreih soleimanjahi

head of virology department/ tarbiat modares university, faculty of medical science majid sadegizadeh

professor, department of genetics, faculty of basic sciences , tarbiat modares university, tehran , iran . ali teimoori

ph.d. candidate ,virology department, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran .

چکیده

هدف: گروه a روتاویروس، مهم‏ترین عامل ویروسی گاستروانتریت و اسهال شدید در نوزادن و کودکان و مسئول حدود 600 تا 870 هزار مرگ در سال است، بنابراین تشخیص و درمان این بیماری از اهمیت ویژه‏ای برخوردار است. بازآرایی ژن‏ها طی پاساژهای متوالی ویروس با نسبت بالای عفونت‏زایی در کشت سلول و همچنین در عفونت‏های مزمن در بیماران با نقص ایمنی تشخیص داده شده است. در این مطالعه روش rt-pcr برای ردیابی، تشخیص و تکثیر ژن‏های روتاویروس استاندارد و بازآرایی شده راه‏اندازی شده است. مواد و روش‏ها: rna روتاویروس از رده سلولی ma-104 آلوده استخراج شد و حضور ژنوم توسط الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید 10 درصد و رنگ‏آمیزی نیترات نقره، مشخص شد. تکثیر توالی کامل ژن‏های کد کننده nsp1, 2, 3، با واکنش rt-pcr، برای روتاویروس استاندارد و بازآرایی شده، با آغازگرهای اختصاصی انجام گرفت. نتایج: بازآرایی در ژن‏های nsp1, 3 با تغییر الگوی مهاجرت این قطعات در ژل، توسط الکتروفورز در ژل پلی آکریل آمید نشان داده شد. طول کامل محصولات ژن‏های کد کننده nsp1, 2, 3 برای روتاویروس استاندارد و بازآرایی شده تکثیر شد و برای تعیین توالی ارسال شد. نتایج، شکل‏گیری قطعات ژنومی بازآرایی شده، طی پاساژ متوالی روتاویروس گاوی سویه rf را نشان داد. نتیجه‏گیری: تکثیر متوالی ویروس با نسبت بالای عفونت‏زایی در کشت سلول و همچنین عفونت‏های مزمن در گروه‏های هدف با نقص ایمنی در تکامل آن نقش دارد و از طرف دیگرروش‏های استفاده شده برای تعیین ویژگی به طور مداوم در حال تحول و تعریف مجدد است. با در نظر گرفتن تحقق موفقیت مطالعات روتاویروس و اهمیت زیاد توسعه واکسن‏های روتاویروسی، مطالعه بیشتر جزئیات بازآرایی و جمع‏آوری داده برای فهم بهتر ویژگی‏های آنتی‏ژنیک و مولکولی ویروس لازم است. مطالعه حاضر اهمیت تنوع ژنتیکی را نشان داده و می‏تواند اطلاعات ارزشمندی در زمینه تکثیر، تنوع، زیست‏شناسی و تکامل روتاویروس را فراهم نماید.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

بررسی حساسیت رده‌های سلولی CEF ،BT ،MDBK و Vero در مقایسه با سلول RBK نسبت به تکثیر ویروس پاراآنفلوانزا گاوی تیپ 3 (bPI3V)

یکی از متداول‌ترین عوامل ویروسی ایجادکننده کمپلکس بیماری تنفسی گاو، ویروس پاراآنفلوانزا گاوی تیپ3 است که متعلق به جنس رسپیروویروس می‌باشد. از آنجایی‌که رشد و تکثیر این ویروس به منظور تشخیص، تولید واکسن و پروژه‌های تحقیقاتی درکشت‌های سلولی صورت می‌گیرد، تعیین مناسب‌ترین سویه سلولی اهمیت زیادی دارد. مطالعه حاضر به منظور تعیین حساسیت سلول‌های لاین Vero ،BT ،MDBK و همچنین سلول پرایمریCEF نسبت به تک...

متن کامل

تعیین اثر عصاره اکالیپتوس بر تکثیر ویروس هرپس سیمپلکس در کشت سلول

زمینه و هدف: در سالهای اخیر با افزایش سویه‌های مقاوم به دارو در انواع ویروس‌ها، یافتن مواد طبیعی با خواص ضد‌ ویروسی که دارای اثرات جانبی کمتری باشند، مورد توجه محققین قرار گرفته است. اکالیپتوس از تیره مورد است که دارای اثرات مختلف درمانی از جمله اثر ضد‌ باکتریایی و ضد قارچی می‌باشد. لذا این مطالعه با هدف تعیین حداقل غلظت کشنده عصاره هیدروالکلی اکالیپتوس روی ویروس هرپس سیمپلکس در کشت سلولی صورت ...

متن کامل

مقایسه تأثیر وضعیت طاق باز و دمر بر وضعیت تنفسی نوزادان نارس مبتلا به سندرم دیسترس تنفسی حاد تحت درمان با پروتکل Insure

کچ ی هد پ ی ش مز ی هن ه و فد : ساسا د مردنس رد نامرد ي سفنت سرتس ي ظنت نادازون داح ي سکا لدابت م ي و نژ د ي سکا ي د هدوب نبرک تسا طسوت هک کبس اـه ي ناـمرد ي فلتخم ي هلمجزا لکتورپ INSURE ماجنا م ي دوش ا اذل . ي هعلاطم ن فدهاب اقم ي هس عضو ي ت اه ي ندب ي عضو رب رمد و زاب قاط ي سفنت ت ي هـب لاتـبم سراـن نادازون ردنس د م ي سفنت سرتس ي لکتورپ اب نامرد تحت داح INSURE ماجنا درگ ...

متن کامل

تکثیر سلول های U937 میکروکپسوله شده در بیوراکتور همزده خارجی

استفاده وسیع سلول­های بنیادی برای کاربردهای درمانی، نیاز به تولید مکرر تعداد زیادی از سلول­ها با خصوصیات مناسب تحت شرایط کنترل شده در بیوراکتورها دارد. در این تحقیق سلول هایU937 به عنوان مدلی از سلول های بنیادی شناور در داخل میکروکپسول های آلژینات-ژلاتین با دانسیته سلولی Cells/ml 106× 5/2 قرار گرفتند. میکروکپسول ها در دو بیوراکتور پرفیوژن با لوپ همزن خارجی و ستونی حبابدار کشت داده شدند. نتایج ب...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
پژوهش های آسیب شناسی زیستی

جلد ۱۵، شماره ۳، صفحات ۱-۹

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023